Le DPI (diagnostic génétique préimplantatoire) a un domaine d’utilisation différent de celui du PGS. Avec le DPI, les anomalies appelées maladies monogéniques sont dépistées.

Le DPI est particulièrement appliqué aux couples à risque de maladie monogénique (fibrose kystique, thalassémie / drépanocytose, hémophilie, trouble chromosomique structurel équilibré, etc.).

Par exemple, la présence d’une translocation structurelle équilibrée chez la mère et le père conduit à la formation de spermatozoïdes ou d’ovules génétiquement déséquilibrés. Si ce spermatozoïde et cet ovule sont fécondés, cela peut provoquer la formation d’un embryon anormal au niveau chromosomique. Une telle situation dans l’embryon peut entraîner la mort de l’embryon, une fausse couche ou la naissance d’un enfant ayant de graves problèmes médicaux.

Qui devrait avoir un diagnostic génétique préimplantatoire (DPI)?

Détection d’un porteur de maladie à gène unique susceptible d’être transmis au bébé lors des dépistages réalisés chez au moins un des couples (ayant réarrangé le porteur de chromosome structurel; translocation, inversion, délétion).

Avoir un enfant avec une maladie monogénique antérieure (telle que la fibrose kystique, la thalassémie, la drépanocytose, l’hémophilie).

Quelques points auxquels vous devez vous préparer avec la méthode de diagnostic génétique préimplantatoire (DPI)

• Certains problèmes techniques peuvent survenir lors de la préparation ou de la biopsie.
• Même si une procédure réussie de FIV et de DPI est réalisée, la grossesse peut ne pas survenir après le transfert.
• Étant donné que seul un certain nombre de chromosomes peuvent être contrôlés, toutes les anomalies chromosomiques et génétiques ne peuvent pas être diagnostiquées avec le DPI.
• En conséquence, seul un certain test peut être effectué sur la cellule biopsiée. Il n’est pas possible de dépister tous les problèmes génétiques avec une seule cellule prélevée pour le test.

Comment et quand effectuer le dépistage et le diagnostic génétique préimplantatoire (PGS et DPI)?

Après la fécondation, l’embryon est suivi dans le système de culture en laboratoire pendant 3 jours jusqu’à ce qu’il atteigne le stade 8-10 cellules. Une ou deux cellules de ces embryons de 3 jours sont biopsiées et certains tests chromosomiques sont effectués. La procédure PGS / PGD est appliquée aux chromosomes (13, 16, 18, 21, 22, X et Y) où l’anomalie chromosomique est observée le plus fréquemment.

Les embryons biopsiés sont suivis jusqu’au 5ème ou 6ème jour jusqu’à ce qu’ils atteignent le stade blastocyste, et seuls les embryons sans anomalies sont transférés dans l’utérus de la femme enceinte.

Quels sont les avantages du dépistage et du diagnostic génétique préimplantatoire (PGS et DPI)?

• Le choix du meilleur embryon sain à transférer contribue à l’augmentation du taux de réussite de la grossesse.
• Il vise à réduire le risque de fausse couche.
• Le choix de l’embryon à congeler ou à cribler est fourni.
• Il vise à encourager les patients qui ont des embryons chromosomiquement normaux mais qui ne peuvent pas concevoir.

Qui est le dépistage et le diagnostic génétiques préimplantatoires appliqués à l’embryon?

Afin de faire un diagnostic génétique chez l’embryon, ces embryons doivent être développés dans des conditions de laboratoire. Pour cela, l’ovule à obtenir de la femme et le spermatozoïde à obtenir du mâle doivent être réunis dans un environnement de laboratoire, c’est-à-dire que la fécondation et le développement de l’embryon doivent être assurés par une technique de micro-injection. En d’autres termes, l’application du diagnostic génétique à l’embryon nécessite une application de haute technologie laborieuse et coûteuse. Par conséquent, cette technique n’est appliquée qu’aux couples à risques particuliers. Les couples pour lesquels le DPI sera appliqué dépendent de l’objectif de la demande.

Dépistage et diagnostic génétiques préimplantatoires

Elle peut être réalisée à différentes fins:

1. Analyse des anomalies

2. Enquête sur la maladie des embryons

3. Identifier le cancer dans les familles à risque

Dépistage génétique préimplantatoire et dépistage des anomalies diagnostiques

Il vise à dépister les embryons en fonction des défauts chromosomiques les plus courants chez les couples qui ont des difficultés à concevoir et présentent un risque accru d’anomalies dans les embryons à obtenir au cours du traitement.

Le dépistage des anomalies a pour but de déterminer les anomalies chromosomiques les plus courantes chez les embryons telles que la trisomie (nombre de chromosomes supérieur à la normale) ou la monosomie (nombre de chromosomes inférieur à la normale). Les embryons présentant une anomalie ne sont pas transférés dans l’utérus et sont détruits. Seuls les embryons connus pour être sains sont transférés au patient. De cette manière, le risque qu’un bébé présentant une anomalie génétique se développe dans l’utérus est éliminé dès le début.

En général, les embryons présentant des anomalies génétiques ne peuvent pas tenir dans l’utérus. Même si l’adhérence se produit, la grossesse entraîne souvent une fausse couche dans les 10 premières semaines. En fait, cette situation crée un grand avantage en termes de protection du propre équilibre de la nature humaine. La nature essaie d’éliminer le malsain en protégeant ce qui est sain. De cette façon, nous voyons très peu de bébés ou d’enfants avec des anomalies autour de nous. Malheureusement, cette règle ne s’applique pas toujours.

Si l’embryon porte de graves défauts génétiques, il se distingue généralement des autres en raison de son développement lent lors de l’observation en laboratoire, en raison d’un retard de développement ou d’un développement de mauvaise qualité, et de tels embryons ne sont pas placés dans l’utérus. Cependant, le développement d’embryons porteurs de trisomie simple (syndrome de Down; trisomie 21) ou de monosomie peut être aussi bon et rapide que ceux en bonne santé.

Il est impossible de distinguer ces embryons des autres par leur vitesse de développement, leur apparence et leur qualité. Les embryons porteurs de ce type d’anomalies peuvent s’accrocher à l’utérus et provoquer la naissance de bébés présentant des anomalies. Bien que la plupart des bébés présentant des anomalies tombent au début de la période, une grande partie d’entre eux peuvent atteindre les dernières semaines de gestation. Ces problèmes sont détectés par échographie, prises de sang et, si nécessaire, méthodes d’amniocentèse lors d’un suivi attentif et régulier de la grossesse. Après la progression de la grossesse, apprendre que le bébé a une anomalie et une interruption de grossesse serait extrêmement traumatisant. Il ne faut pas oublier que si le suivi de la grossesse n’est pas du tout effectué, la naissance d’un bébé handicapé ou handicapé est en cause.

Des techniques de procréation assistée sont utilisées chez certains couples qui ont des difficultés à concevoir. Dans cette technique, les embryons sont obtenus par méthode de micro-injection utilisant les spermatozoïdes et les ovules du couple. Si le couple présente un risque élevé d’anomalies génétiques chez les embryons, le PGT est recommandé.

Les couples à haut risque peuvent être répertoriés comme suit:

1. L’âge de la femme enceinte est de 37 ans et plus

2. Pertes de grossesse récurrentes précoces (fausses couches)

3. Échec de grossesse lors d’une fécondation in vitro répétée – traitements par micro-injection ou conclusion de grossesse avec fausses couches

4. Antécédents de naissance anormale et de fausse couche

5. Quelques anomalies formelles spéciales de l’ovule ou du spermatozoïde

Enquête sur la maladie des embryons

Le principal objectif de la recherche sur la maladie chez les embryons est de parvenir à une grossesse saine en transférant des embryons indemnes de maladie à des couples qui peuvent concevoir spontanément mais qui risquent d’avoir une grossesse malade parce qu’ils sont porteurs d’une certaine maladie. Certaines maladies à héritage génétique et familial sont transmises au bébé par la mère, le père ou les deux. Les couples qui sont porteurs de ces maladies peuvent mener une grossesse en bonne santé grâce à un examen génétique des embryons.

On sait que toutes les cellules de notre corps contiennent un code génétique spécial et que ce code a des caractéristiques différentes chez chaque individu. Toutes les tâches de nos cellules sont planifiées en fonction de ces codes génétiques. De petites modifications du code génétique entraînent parfois des déficiences ou des dommages irréversibles, conduisant à des maladies génétiques. Jusqu’à récemment, le diagnostic de ces maladies n’était défini que cliniquement. Grâce aux progrès de la science génétique et aux études visant à déchiffrer les codes génétiques, il est possible de diagnostiquer ces maladies au niveau du gène. Les changements génétiques qui causent la maladie peuvent être déterminés avec des méthodes appelées FISH et PCR. Cependant, ces méthodes laborieuses et chronophages ont maintenant été remplacées par des dispositifs qui donnent des résultats beaucoup plus rapides et plus fiables.

Lors des examens génétiques, les cellules de l’échantillon sanguin prélevé sur l’individu sont collectées et le matériel génétique qu’elles contiennent est rassemblé. L’ADN est répliqué avec des méthodes spéciales afin de fournir une quantité suffisante de matériel pour permettre un examen génétique sans erreur. Les séquences géniques sur l’ADN répliqué sont identifiées une par une. Les changements ou perturbations possibles sont identifiés. Ces examens aident à diagnostiquer les maladies et à identifier certaines personnes à risque. Par exemple, avec cette méthode, des maladies telles que la dystrophie myotonique ou la fibrose kystique qui surviennent dans l’enfance et provoquent de graves problèmes de santé peuvent être diagnostiquées. Un grand nombre de maladies peuvent être détectées avec cette technique.

Ces maladies peuvent être répertoriées comme suit:

Maladies génétiques:
Thalassémie (anémie méditerranéenne)
Fibrose kystique
Dystrophie myotonique
Syndrome du X fragile
Perte auditive congénitale
Déficit en achondroplasie alpha-1 antitrypsine
Hémachromatose
La maladie de Huntington
L’anémie falciforme
Atrophie musculaire spinale
Hyperplasie surrénale congénitale
Ataxie télangiectasie
Maladies du système cardiovasculaire
Déficit en facteur V et en prothrombine
Déficit en facteur VIII
Mutation du facteur V de Leiden
Détermination de la susceptibilité au cancer dans les familles à risque

Certains types de cancer ont des caractéristiques familiales et toutes les personnes de la famille sont sujettes au cancer. Chaque nouvelle génération a un risque élevé d’être touchée par cette maladie. Les maladies qui peuvent être examinées en termes de sensibilité au niveau de l’embryon peuvent être répertoriées comme suit:

Cancer du sein
Cancer de la vessie
Cancer de la prostate
étinoblastome
Lymphome et leucémie
La maladie d’Alzheimer

Quand l’embryon peut-il être examiné génétiquement?

L’examen génétique peut être effectué à trois stades distincts du développement de l’embryon:

1. Le jour où la fécondation est observée (1er jour de la formation de l’embryon) – Biopsie du corps polaire

2. 3e jour du développement embryonnaire – Biopsie blastomère

3. 5ème jour de développement embryonnaire – biopsie du trophectoderme

Biopsie du corps polaire (examen génétique de l’ovule)

Une fois l’ovule expulsé de l’ovaire, il expulse la moitié de sa structure génétique (un ensemble de chromosomes) de la cellule avec une partie que nous appelons le premier corps polaire.

Le 1er corps polaire porte une copie exacte de la constitution génétique de l’œuf. Après l’union de l’ovule et du sperme, une autre copie, appelée cette fois le 2ème corps polaire, est jetée hors de la cellule.

En d’autres termes, un œuf fécondé (jour 1 de la formation de l’embryon) porte deux corps polaires. Ces deux structures dégénèrent et disparaissent au bout de peu de temps. Les deux corps polaires peuvent être extraits de l’enveloppe externe de la cellule et examinés génétiquement. Les deux corps polaires indiquent si l’œuf contient des erreurs chromosomiques aux stades de la pré-fécondation.

L’étude des objets polaires nous permet d’identifier les problèmes génétiques appartenant à l’œuf.

Ses avantages sont:

Il peut être appliqué à tous les ovules.
Étant donné que l’embryon sera transféré après au moins 3 jours, la période de diagnostic génétique est plus longue.
Les corps polaires sont des structures qui ne contribuent pas au développement de l’embryon et vont dégénérer après un certain temps. Sa présence ou sa biopsie n’a pas d’effet positif ou négatif sur le développement ultérieur de l’embryon.

Les inconvénients de la biopsie du corps polaire sont:

Étant donné que la structure génétique qu’elle contient dégénère en peu de temps, le risque de ne pas obtenir d’informations claires à la suite d’un examen génétique est plus élevé.

La constitution génétique des corps polaires ne reflète que les problèmes génétiques provenant de la mère, à savoir l’ovule. Les erreurs causées par le père, le spermatozoïde, ne peuvent pas être détectées avec cette méthode. Comme il ne s’agit que de l’ovule examiné, le résultat ne reflète pas complètement l’embryon.

La biopsie du corps polaire est préférable uniquement lorsque l’examen de l’œuf sera suffisant. Le meilleur exemple de cette situation est l’âge maternel avancé. La bypsie du corps polaire est une bonne alternative dans l’identification des erreurs génétiques pouvant résulter de l’ovule chez les femmes âgées de 37 ans et plus qui sont incluses dans le programme de techniques de procréation assistée.

Biopsie blastomère; examen génétique de l’embryon

Dans cette application, une cellule de l’embryon est prélevée au 3ème jour de son développement et examinée génétiquement. Après la biopsie de l’embryon réalisée par des mains expérimentées, l’embryon compense immédiatement la cellule manquante et continue de croître sans aucun dommage. La cellule examinée montre si l’embryon a un problème génétique ou non, et seuls les embryons trouvés génétiquement normaux sont transférés au patient.

L’embryon contient environ 6 à 8 cellules au troisième jour de son développement. Chacune de ces cellules, appelées blastomères, agit comme une cellule souche et sert de source à de nouvelles cellules qui se transformeront en organes et tissus complètement différents lors du développement ultérieur de l’embryon. Le retrait d’une ou deux de ces cellules n’affecte pas le développement ultérieur de l’embryon. Les cellules restantes compensent immédiatement cette carence et poursuivent leur développement. Puisque toutes les cellules ont la capacité de se transformer en différents tissus, aucune déficience tissulaire ou organique n’est observée.

Lorsque l’embryon atteint le 3ème jour, le taux de développement est contrôlé. Étant donné qu’un embryon à croissance lente sera affecté par la biopsie du blastomère, seuls les embryons bien développés sont considérés comme aptes à un examen génétique. La membrane que nous appelons la zona pellucida qui entoure les embryons aptes à l’examen est ouverte à l’aide de méthodes mécaniques ou d’énergie laser.

À l’aide d’une fine pipette placée à travers cette ouverture, l’une des cellules est aspirée.

Cette cellule est envoyée pour des tests génétiques. La constitution génétique de la cellule reflète exactement l’embryon. Si la cellule est génétiquement anormale ou défectueuse, cet embryon ne sera pas transféré, et de cette manière, un embryon qui n’a aucune chance d’adhérer à l’utérus et peut provoquer une grossesse malsaine ne sera pas transféré.

La période la plus appropriée pour l’examen génétique est considérée comme le 3ème jour. Étant donné que la cellule examinée reflétera exactement l’embryon, des erreurs à la fois de l’ovule et du sperme sont observées, contrairement à la biopsie du corps polaire.

Biopsie du trophectoderme

Poursuivant son développement jusqu’au 5ème jour, l’embryon atteint le stade blastocyste. À ce stade, la masse cellulaire interne qui formera le bébé à l’avenir et les structures du trophectoderme qui formeront le placenta et ses appendices se distinguent les unes des autres.

À ce stade, plus d’une cellule peut être retirée de la couche de trophectoderme. En soumettant ces cellules à un examen génétique, il peut être déterminé si le blastocyste a une structure génétique saine.

Les avantages de la biopsie du trophectoderme peuvent être énumérés comme suit:

– Étant donné que seuls les embryons les mieux développés atteignent le stade blastocyste, un nombre limité d’embryons présentant le potentiel de développement ultérieur le plus élevé est examiné pendant cette période.
– Étant donné que les cellules trophectodémiques ne participeront pas au développement de l’embryon, elles ne seront responsables que du développement du placenta et de ses appendices, il n’est pas possible que leur élimination affecte le développement ultérieur de l’embryon.
Plus d’une cellule peut être prélevée sur le trophectoderme et examinée.

Les inconvénients de la biopsie du trophectoderme sont:

Le temps de transfert d’embryons est très limité. Atteindre le résultat en si peu de temps pose un énorme défi.

Dans cette période, la structure du mosaïcisme est élevée parmi les cellules. La mosaïque est la présence de plus d’un groupe de cellules avec une structure génétique différente dans le même embryon. Alors qu’une certaine proportion de mosaïcisme ne cause pas de problèmes de santé, de graves problèmes génétiques peuvent survenir en cas de taux élevé de mosaïcisme. Les groupes de cellules de la mosaïque qui peuvent se former dans l’embryon au stade du blastocyste dégénéreront avec le temps et ne pourront pas atteindre les stades de développement avancés de l’embryon. Cependant, l’examen génétique de ces cellules lors de la biopsie créera une idée erronée sur l’embryon, ce qui compromettra le résultat de l’examen génétique. Pour ces raisons, la biopsie du trophectoderme n’est pas une méthode privilégiée aujourd’hui.

Comment se déroule un examen génétique?

Détermination du nombre de chromosomes: La structure nucléaire de la cellule prélevée sur l’embryon, qui porte l’information génétique, est séparée. Pour l’identification des chromosomes, une technique appelée FISH (Fluorescent In-Situ Hybridization) est utilisée. Dans cette technique, tout d’abord, des sondes (reconnaisseurs) portant des colorants fluorescents colorés à relier en reconnaissant que le chromosome sont créés pour chaque chromosome. Lorsque le noyau de la cellule est traité avec ces sondes, le nombre de chromosomes présents peut être déterminé au microscope.

Identification de l’échange d’informations (translocation) ou de la déficience sur le chromosome: La rupture d’un morceau de deux chromosomes séparés et le remplacement de l’autre s’appelle “translocation”. Les translocations se produisent plus fréquemment que prévu. Cependant, comme il reste équilibré dans le corps, il ne pose aucun problème de santé pour la personne. Ces personnes, que nous appelons porteuses équilibrées, sont confrontées à l’infertilité ou à des fausses couches récurrentes lorsqu’elles veulent avoir des enfants. La raison en est que cette erreur chromosomique équilibrée est transférée aux cellules reproductrices (spermatozoïdes ou ovules) déséquilibrées. Cette distribution chromosomique déséquilibrée rend un embryon nouvellement formé en mauvaise santé et la grossesse se termine souvent par une fausse couche.

Dans un tel cas, les embryons obtenus du couple peuvent être examinés en termes de translocation et les embryons présentant une structure chromosomique anormale peuvent être distingués. Tout d’abord, le type de translocation transféré de la mère ou du père est déterminé, quels chromosomes se sont cassés et déplacés dans quelle région. Des sondes qui reconnaîtront ces régions et donneront une couleur fluorescente au microscope

Identification des maladies monogéniques: Il est très important pour quelle maladie être examinée. Sur quel chromosome se situe l’erreur génétique à l’origine de la maladie et de quel type d’erreur il s’agit, cela est clairement déterminé par les examens effectués chez le parent atteint de la maladie. Plus tard, des erreurs génétiques similaires sont étudiées dans les embryons. La technique utilisée dans cette revue est légèrement différente et nécessite l’utilisation de détecteurs de gènes avancés. Peut-être la caractéristique la plus importante du dispositif de PCR séquenceur, que nous appelons un détecteur de gène, qui révèle l’erreur en effectuant une analyse de séquence dans les gènes, est que tous ces examens peuvent être obtenus avec une seule cellule. (Par exemple l’anémie méditerranéenne)